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青海供應FISH熒光批發(fā)

發(fā)布時間:2024-07-19 00:54:04
青海供應FISH熒光批發(fā)

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蛋白同位素標記是經典的一種蛋白示蹤和蛋白組學定量技術,與體外標記技術相比,同位素標記技術屬于體內標記。原理:用天然同位素(輕型)或穩(wěn)定同位素 (重型)標記的必需氨基酸取代細胞培養(yǎng)基中相應氨基酸,細胞經5-6個倍增周期后,穩(wěn)定同位素標記的氨基酸全部摻入到細胞新合成的蛋白質中替代了原有氨基酸。不同標記細胞的裂解蛋白按細胞數或蛋白量等比例混合,經分離、純化后進行質譜鑒定,根據一級質譜圖中兩個同位素型肽段的面積比較進行相對定量。

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熒光原位雜交儀的探針有DNA探針和RNA探針,可對動物組織和植物組織中核酸進行檢測,特異性較高。雜交所用的探針大致可以分為三類:(1)染色體特異重復序列探針;(2)全染色體或染色體區(qū)域特異性探針;(3)原位雜交儀特異性位置探針,由一個或幾個克隆序列組成。探針的熒光素標記可以采用直接和間接標記的方法。間接標記是采用生物系標記的dUTP經過缺口平移法進行標記;而直接標記法是將熒光素直接與探針核苷酸蔌磷酸戊糖骨架共價結合,或在缺口平移法標記探針時將熒光素核苷三磷酸摻入。

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StatSpinTermoBrite原位雜交儀可根據實驗者的設計,在玻片上一步完成原位雜交(FISH)中變性和雜交兩個過程,而且能嚴格控制反應溫度和環(huán)境濕度,在保證實驗的成功率和重復率的基礎上極大地提高實驗效率。ThermoBrite采用微電腦控溫,程序化變性/雜交步驟,使用方便。在獲得理想的實驗結果同時,大大縮短了手工操作時間。變性/雜交在內連續(xù)完成,縮短手工操作時間50%以上,減少有害溶液的用量,控溫精準,無須玻片裝滿,每次可以操作12個樣本,玻片放置/取出方便。

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動態(tài)濁度法是指通過檢測反應混合物的濁度到達預先設定的吸光度所需要的反應時間,或是檢測濁度增加速度來檢測內毒素的方法。在適宜的條件下(溫度,pH值及無干擾物質),細菌內毒素激活C因子,引起一系列酶促反應,使鱟試劑產生凝集反應形成凝膠。隨著凝膠的形成,反應液的吸光度(OD值,濁度)增加,OD值增加的速度與內毒素濃度成正相關。換言之,OD值上升某一預設限值(啟動OD)所需要的時間(定義為啟動時間)與內毒素濃度成負相關,啟動時間的對數與內毒素濃度的對數成線性關系,據此,熒光原位雜交儀可以定量檢測供試品的內毒素濃度??蛻粢部梢砸笪覀兲峁┌攵糠椒?凝膠法進行樣品內毒素限度水平檢測。

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大腸桿菌(E.coli)重組蛋白表達技術經過多年的發(fā)展,全自動原位雜交儀已經變得日趨成熟。但想要在大腸桿菌表達體系獲得較高水平的可溶性以及高產量的蛋白表達,尤其是針對大分子蛋白和某些藥物類蛋白,一個優(yōu)質的表達策略必不可少??蛻糁恍枰峁┪覀円欢蔚鞍仔蛄?,CDS或蛋白名稱,我們富有經驗的科學家均可以為您在較短的時間內制定一個完整的蛋白表達和純化方案。常見的小分子(分子量<10 kDa)蛋白類藥物,如Leptin,利拉魯肽,EGF等在原核表達過程中以親和標簽+融合蛋白形式進行表達,發(fā)酵和純化。

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首先,成功率!原位雜交儀可以大大提高您實驗的成功率。全程由機器程序控制的變性、復性過程避免了手工操作過程中的不確定性,同時也避免了甲酰胺、水浴鍋等因素造成的影響。一次FISH實驗僅探針便價值逾千元,如果因為操作失誤而導致實驗結果作廢,損失相當慘重。若干次實驗失誤的損失便足以購買一臺雜交儀了。其次,效率!原位雜交儀可大大增進您工作的效率,一臺ThermoBrite雜交儀可同時進行12個樣本的雜交工作,試想,如果您要同時手工操作12個樣本的變性、梯度脫水,干燥、加探針、預熱雜交盒、雜交的過程,是一件多么繁瑣且耗時的工作!