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哈爾濱供應(yīng)自動(dòng)分子雜交儀廠家

發(fā)布時(shí)間:2024-01-05 01:00:59
哈爾濱供應(yīng)自動(dòng)分子雜交儀廠家

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原位雜交儀中重組蛋白(Recombinant Protein),是指應(yīng)用重組DNA或RNA技術(shù),獲得具有一定功能和活性的蛋白質(zhì)??赏ㄟ^(guò)體內(nèi)和體外兩種途徑獲得,兩種方法均應(yīng)用基因重組技術(shù),獲得連接有可以翻譯成目的蛋白的基因片段的重組載體,然后將其轉(zhuǎn)入可以表達(dá)目的蛋白的宿主細(xì)胞從而表達(dá)特定的重組蛋白分子。純化的重組蛋白是信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分析、分析方法開(kāi)發(fā)和藥物研發(fā)的重要工具。

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蛋白同位素標(biāo)記是經(jīng)典的一種蛋白示蹤和蛋白組學(xué)定量技術(shù),與體外標(biāo)記技術(shù)相比,同位素標(biāo)記技術(shù)屬于體內(nèi)標(biāo)記。原理:用天然同位素(輕型)或穩(wěn)定同位素 (重型)標(biāo)記的必需氨基酸取代細(xì)胞培養(yǎng)基中相應(yīng)氨基酸,細(xì)胞經(jīng)5-6個(gè)倍增周期后,穩(wěn)定同位素標(biāo)記的氨基酸全部摻入到細(xì)胞新合成的蛋白質(zhì)中替代了原有氨基酸。不同標(biāo)記細(xì)胞的裂解蛋白按細(xì)胞數(shù)或蛋白量等比例混合,經(jīng)分離、純化后進(jìn)行質(zhì)譜鑒定,根據(jù)一級(jí)質(zhì)譜圖中兩個(gè)同位素型肽段的面積比較進(jìn)行相對(duì)定量。

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蛋白酵母表達(dá)系統(tǒng)兼具部分原核蛋白表達(dá)特征(培養(yǎng)條件簡(jiǎn)單、生長(zhǎng)速度快、表達(dá)水平高、操作簡(jiǎn)便)和部分真核蛋白表達(dá)特征(蛋白翻譯后能進(jìn)行正確加工、修飾,合理的空間折疊)。重組蛋白酵母表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)勢(shì)主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:重組蛋白既可以分泌形式又可以非分泌形式在酵母系統(tǒng)中表達(dá),且能高水平表達(dá),達(dá)到5g/L;外源蛋白基因可以以整合的方式插入到酵母染色體上,隨染色體復(fù)制而不會(huì)丟失;酵母具有真核生物的亞細(xì)胞結(jié)構(gòu),具有糖基化、脂肪?;⒌鞍琢姿峄确g后修飾加工功能,適合活性蛋白表達(dá);容易實(shí)現(xiàn)超高密度發(fā)酵,卡梅德生物能同時(shí)為客戶提供多種規(guī)格的蛋白酵母發(fā)酵規(guī)模。

哈爾濱供應(yīng)自動(dòng)分子雜交儀廠家

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全自動(dòng)原位雜交儀中的噬菌體展示技術(shù)為全人源治療性抗體的研發(fā)提供了基礎(chǔ),拓展了定向進(jìn)化技術(shù)在抗體多肽改造篩選方面的應(yīng)用,對(duì)抗體藥物的研制具有重要意義。熒光原位雜交儀噬菌體展示系統(tǒng):M13單鏈絲狀噬菌體展示系統(tǒng)是目前應(yīng)用廣泛的文庫(kù)展示系統(tǒng),通過(guò)將蛋白、抗體或多肽與噬菌體pIII蛋白融合表達(dá),使之參與噬菌體組裝,并展示在噬菌體表面,形成噬菌體展示文庫(kù)。